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呼吸合胞病毒動物模型構建
更新時間：2025-07-11
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廠商性質(zhì)：其他
一、呼吸合胞病毒動物模型構建選擇依據(jù)
| 動物種類 | 適用場景 | 優(yōu)缺點 |
|---|---|---|
| 棉鼠 | 經(jīng)典模型，支持RSV高效復制，模擬人類病理特征（細支氣管炎） | ? 高病毒載量 ? 需特殊飼養(yǎng)（無病原體環(huán)境） |
| BALB/c小鼠 | 廣泛用于免疫機制研究，對RSV敏感（需幼鼠或免疫抑制處理） | ? 成本低、工具鼠品系多 ? 病毒復制有限（需高滴度接種） |
| 恒河猴 | 接近人類感染，用于疫苗臨床前評價 | ? 生理相似性高 ? 倫理和成本限制 |
| 雪貂 | 研究RSV與流感共感染或氣道生理變化 | ? 呼吸生理接近人類 ? 病毒適應性需驗證 |
二、呼吸合胞病毒動物模型構建核心步驟
1. 病毒準備
毒株選擇：
實驗室株（如RSV A2、Long株）或臨床分離株（如RSV B/ON1）。
病毒擴增：HEp-2細胞培養(yǎng)，滴度≥1×10? PFU/mL（空斑試驗驗證）。
2. 動物感染
接種途徑：
麻醉動物（異f烷），垂直滴鼻（50 μL，含1×10?–10? PFU病毒）。
幼鼠模型（<7日齡）：無需麻醉，直接滴鼻（3–5 μL）。
鼻內(nèi)接種（最c用）：
氣管內(nèi)接種（精準下呼吸道感染）：需手術暴露氣管，注射病毒液（適用于棉鼠或猴）。
3. 感染后監(jiān)測
病毒載量檢測：
采集肺組織（感染后3–5天峰值期），勻漿后qPCR檢測RSV N基因或噬斑試驗。
病理評估：
肺組織H&E染色：細支氣管周圍炎癥、上皮細胞壞死評分（0–4分）。
免疫組化：RSV F蛋白染色定位病毒分布。
免疫應答分析：
肺泡灌洗液（BALF）：細胞計數(shù)（中性粒細胞/淋巴細胞）、ELISA檢測IL-6、IFN-γ等。
脾臟/淋巴結：流式細胞術分析T細胞亞群（CD4+/CD8+）。
三、模型優(yōu)化策略
1. 增強病毒復制（小鼠模型）
免疫抑制預處理：
環(huán)磷x胺（100 mg/kg，腹腔注射）或抗IFNAR1抗體（阻斷I型干擾素應答）。
幼鼠優(yōu)先：<7日齡小鼠因免疫系統(tǒng)未成熟，病毒復制更顯著。
2. 模擬重癥感染
高滴度病毒（≥10? PFU/只）或免疫缺陷鼠（如STAT1?/?）。
繼發(fā)細菌感染：RSV感染后接種肺炎鏈球菌（模擬臨床并發(fā)癥）。
3. 疫苗評價模型
攻毒實驗設計：
免疫后4周接種RSV，比較肺病毒載量（疫苗組 vs 佐劑對照組）。
注意：甲醛滅活RSV疫苗可能引發(fā)Th2型免疫偏移（嗜酸性粒細胞浸潤）。
四、注意事項
生物安全：RSV操作需在BSL-2實驗室進行，動物飼養(yǎng)需獨立通風籠具（IVC）。
對照設置：
陰性對照（PBS接種）、滅活病毒對照（評估非特異性炎癥）。
動態(tài)監(jiān)測：
體重下降（>20%需安l死）、呼吸頻率（全身體積描記法）。
