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燙傷感染動(dòng)物模型
更新時(shí)間：2025-07-18
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燙傷感染動(dòng)物模型
一、燙傷感染模型的定義與分類
1. 定義
燙傷感染模型是一種復(fù)合型動(dòng)物模型，通過人為制造燙傷創(chuàng)面并接種病原菌，模擬臨床燙傷后創(chuàng)面感染的病理過程。其核心目標(biāo)是研究感染機(jī)制、評估抗感染藥物及創(chuàng)面愈合策略。
燙傷基礎(chǔ)定義：由無火焰高溫液體（沸水、熱油）、固體（熱金屬）或蒸汽導(dǎo)致的組織損傷，破壞皮膚屏障功能，增加病原體定植風(fēng)險(xiǎn)。
2. 分類依據(jù)
根據(jù)感染發(fā)生方式分為兩類：
自發(fā)感染模型：燙傷后不主動(dòng)接種病原菌，依賴環(huán)境微生物自然定植，模擬臨床繼發(fā)感染。
外源性感染模型：燙傷后立即接種特定病原菌（如金黃色pu萄球菌、銅綠假單胞菌），可控性強(qiáng)，用于機(jī)制研究。
燙傷深度分級（基于組織損傷程度）：
| 分級 | 病理特征 | 臨床意義 |
|---|---|---|
| Ⅰ度 | 表皮紅腫、疼痛，無水皰 | 輕微損傷，自愈快 |
| 淺Ⅱ度 | 表皮全層壞死，水皰形成，真皮淺層炎癥 | 易感染，愈合時(shí)間中等 |
| 深Ⅱ度 | 真皮深層壞死，痛覺遲鈍，基底蒼白 | 高感染風(fēng)險(xiǎn)，易留瘢痕 |
| Ⅲ度 | 全層皮膚壞死，呈蠟白/碳化，干燥無彈性 | 需植皮，感染并發(fā)癥率高 |
| Ⅳ度 | 深達(dá)肌肉/骨骼 | 罕見，多合并全身性感染 |
| 注：分級標(biāo)準(zhǔn)參考三度四分法。 |
二、動(dòng)物模型選擇與構(gòu)建方法
1. 常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及特點(diǎn)
| 動(dòng)物 | 優(yōu)勢 | 局限性 | 適用場景 |
|---|---|---|---|
| 小鼠 | 成本低、易操作、遺傳背景清晰 | 皮膚薄，與人類差異較大 | 大規(guī)模藥物篩選、機(jī)制初探 |
| 大鼠 | 體型適中，適合復(fù)雜操作（如休克復(fù)蘇） | 皮膚結(jié)構(gòu)與人類仍存差異 | 感染動(dòng)力學(xué)、全身炎癥反應(yīng)研究 |
| 豬 | 皮膚結(jié)構(gòu)（厚度、毛囊、代謝）與人類高度相似 | 成本高、飼養(yǎng)復(fù)雜 | 臨床前治療策略驗(yàn)證 |
| 兔/豚鼠 | 皮膚較厚，適用于深度燙傷模型 | 免疫反應(yīng)差異需謹(jǐn)慎解讀 | 創(chuàng)面修復(fù)與瘢痕形成研究 |
2. 模型構(gòu)建的核心步驟
（1）燙傷創(chuàng)面制備
方法選擇：
熱水燙傷法：動(dòng)物脫毛麻醉后，背部浸入恒溫水?。囟?時(shí)間因動(dòng)物而異）：
大鼠：92℃水浸18秒 → Ⅲ度燙傷；100℃砝碼壓5秒 → 淺Ⅱ度。
小鼠：80℃水浸20秒 → Ⅲ度；55℃水浸20秒 → Ⅱ度。
熱金屬接觸法：銅塊/電烙鐵預(yù)加熱至80–100℃，垂直按壓皮膚（時(shí)間控制深度）。
深度驗(yàn)證：48小時(shí)后組織學(xué)檢查（HE染色），確認(rèn)真皮壞死程度。
（2）病原菌接種
菌種選擇：臨床常見病原體如金黃色pu萄球菌（ATCC 25923）、銅綠假單胞菌。
接種方法：
刮擦法：創(chuàng)面輕微刮擦后滴注菌液（20μl，濃度1×10?–1×10? CFU/mL）。
直接涂布：均勻涂布菌液于創(chuàng)面（大鼠：1ml菌液）。
優(yōu)化濃度：小鼠模型驗(yàn)證顯示1×10? CFU/mL為感染濃度（顯著延遲愈合，P<0.01）。
（3）感染維持與監(jiān)控
單籠飼養(yǎng)避免交叉感染，自由飲水飲食。
定期檢測痂下細(xì)菌載量（>1×10? CFU/g組織提示感染成立）。
三、燙傷感染動(dòng)物模型評估指標(biāo)
1. 感染特異性指標(biāo)
細(xì)菌載量：
痂下組織定量培養(yǎng)（CFU/g）。
內(nèi)臟（肝、腎、肺）細(xì)菌定植評估全身播散。
炎癥反應(yīng)：
局部：HE染色觀察中性粒細(xì)胞/單核細(xì)胞浸潤；ELISA檢測創(chuàng)面促炎因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）↑ 和抗炎因子（IL-10）↓。
全身：血清HMGB-1（損傷相關(guān)分子）、透明質(zhì)酸↑，纖維連接蛋白↓。
2. 創(chuàng)面愈合指標(biāo)
愈合時(shí)間：感染組愈合時(shí)間顯著延長（小鼠：15.92±0.34天 → 21±0.95天）。
組織病理學(xué)：
光鏡觀察上皮再生、膠原排列、肉芽形成。
IHC染色檢測凋亡標(biāo)志物（如cC3上調(diào)）。
3. 全身并發(fā)癥指標(biāo)
死亡率：感染組5天存活率降至40%（對照組99.99%）。
血常規(guī)：白細(xì)胞總數(shù)↑（尤其粒細(xì)胞/單核細(xì)胞）
